杂交瘤电融合技术平台

一、 基本介绍

杂交瘤技术是制备单克隆抗体的经典方法，自1975年问世以来，一直是生命科学研究和生物医药产业不可或缺的工具。该平台通过将免疫细胞与骨髓瘤细胞融合，产生既能分泌特异性抗体，又能无限增殖的杂交瘤细胞，从而实现对目标抗原的特异性、持续性的抗体生产。

二、 基本原理

杂交瘤电融合技术利用高压脉冲电场，将免疫小鼠脾细胞（B细胞）与骨髓瘤细胞进行融合，形成杂交瘤细胞。B细胞具有分泌特异性抗体的能力，而骨髓瘤细胞具有无限增殖的特性。通过电融合，将两种细胞的优势结合，获得既能分泌特异性抗体，又能无限增殖的杂交瘤细胞，从而实现对目标抗原的特异性、持续性的抗体生产。

三、 核心流程

1. 免疫小鼠： 使用目标抗原免疫小鼠，刺激小鼠脾脏产生特异性B细胞。
2. 制备细胞悬液： 分离免疫小鼠脾细胞，与骨髓瘤细胞按一定比例混合，制备细胞悬液。
3. 电融合： 将细胞悬液加入电融合仪中，施加高压脉冲电场，促使细胞膜发生可逆性穿孔，相邻细胞膜融合，形成杂交瘤细胞。
4. 筛选与克隆： 利用HAT培养基筛选杂交瘤细胞，并通过有限稀释法进行单克隆化，获得稳定分泌目标抗体的杂交瘤细胞株。
5. 抗体生产与纯化： 扩大培养杂交瘤细胞，收集上清液，采用蛋白A/G亲和层析等方法纯化抗体。

四、 技术优势

1.我们搭建了多种蛋白表达系统平台，尤其是膜蛋白平台，能够为GPCR等膜蛋白的研发提供有力支持。实现天然构象和高度稳定性，有效提高抗原呈递效率。

2.结合流式细胞术和高通量筛选技术，能够快速筛选具有高亲和力和特异性的单克隆抗体，显著缩短筛选周期。

3.适用于GPCR、离子通道、转运蛋白和其他多种膜蛋白靶点，具备广泛的应用潜力和市场价值。

4.通过杂交瘤技术结合免疫原优化，有效提升抗体与膜蛋白的结合强度和特异性，确保高效识别和结合。

5.采用优化的细胞系和培养体系，保证抗体的高效表达和批量稳定制备，确保工艺可重复性和产品一致性。

1. GPRC5D 抗体的筛选
2. DDR1抗体的筛选